Практикум по вирусологии

Этот скрипт предназначен для студентов биологических факультетов, особенно ветеринарной медицины и биотехнологий. В нем представлены основные вирусологические тесты и подробно описаны методы, используемые в диагностических лабораториях для обнаружения и идентификации вирусов. Мы надеемся, что книга, которую мы вам предоставляем, станет ценным дополнением к практическим занятиям в области вирусологии, молекулярной вирусологии и молекулярной биологии, а также окажется полезной в вашей последующей работе в лаборатории.

Таблица содержание:

Оглавление:

ОТ АВТОРОВ 5

I. ВИРУСОЛОГИЯ 6

2. РАБОТА В ЛАБОРАТОРИИ 7

3. СБОР И ХРАНЕНИЕ МАТЕРИАЛА ДЛЯ ВИРИРОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ 8

3.1. Сбор и обработка проб для вирусологических исследований 9

3.1.1. Забор крови 9

3.1.2. Сбор стула 12

3.1.3. Извлечение внутренних органов у павших лошадей при подозрении на инфекционный ринит и пневмонию, вирус герпеса (rhinopneumoniitis equorum) 13

3.1.4. Взятие мазков из носа у коров с подозрением на инфекционный ринотрахеит (риноирахеит бойом. ИБР/ИПВ, бычья проказа) 13

4. КЛЕТОЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ 15

4.1. Пищевые жидкости 16

4.1.1. Приготовление питательной жидкости ЭМЕМ для культуры клеток 17

4.2. Создание клеточных культур 18

4.2.1. Пассирование клеток почки кролика RK-13 ​​в стационарной фазе роста 19

5. БАНКОВСКОЕ ДЕЛО КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР 21

5.1. Заморозка клеток RK-13 ​​22

5.2. Оттаивание тканей 23

6. ВЫДЕЛЕНИЕ ВИРУСОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТКАНЕЙ, КЛЕТОК ЖИВОТНЫХ, ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ И ЭМБРИОНОВ ПТИЦ 25

6.1. Заражение лабораторных животных 26

6.1.1. Внутрибрюшинная инфекция 26

6.1.2. Подкожная инфекция 27

6.1.3. Внутримышечная инфекция 27

6.1.4. Внутривенная инфекция 27

6.2. Заражение эмбрионов яиц птиц 28

6.2.1. Инфекция воздушной камеры 29

6.2.2. Инфекция хориоаллантоисного мешка 30

6.2.3. Инфекция хориоаллантоисной мембраны 31

6.2.4. Сбор вируса из аллантоисной жидкости 32

6.3. Инфицирование клеточных линий 33

6.3.1. Инфицирование клеток RK-13 ​​вирусом EA 33

7. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ОЦЕНИВАНИЕ ВИРУСОВ 36

7.1. Техника разведения и титрование вируса 37

7.2. Определение титра вируса ЭА по методу Рида и Мунка 38

8. ДЕЙСТВИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ ВИРУСОВ 40

8.1. Оценка чувствительности к 56°С вируса болезни Ньюкасла (болезнь Ньюкасла, NDV) 44

9. ПОЛУЧЕНИЕ И ОЧИСТКА ВИРУСНЫХ ПРЕПАРАТОВ 46

9.1. Выделение РНК вируса артериита из спермы зараженных племенных жеребцов тризольным методом 48

9.2. Выделение ДНК вируса инфекционного риносинусита лошадей (Herpesviridae) из тканей и органов абортированных плодов 50

10. ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (ПЦР) ПРИ ОБНАРУЖЕНИИ ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ВИРУСОВ 51

10.1. Обнаружение фрагмента гена VP2 парвовируса собак (CPV) с помощью классической реакции ПЦР 55

10.2. Обнаружение фрагмента гена нуклеопротеина вируса чумы собак (CDV) методом RT-PCR 57

10.3. Обнаружение фрагмента гена, кодирующего гликопротеин gC вируса BHV, с помощью ПЦР в реальном времени 58

11. СИСТЕМАТИКА ВИРУСОВ 60

• ISBN: 978-83-7259-215-6
• Автор: Лукаш Адашек, Ежи Зентек, Станислав Винярчик
• Опубликовано: 1
• Год издания: 2013.
• Формат: 165 х. 235
• Количество страниц: 70